薄膜過濾法微生物限度檢查CYW-300S

薄膜過濾法微生物限度檢查CYW-300S主要特征：

1.一體(ti) 化超小型設計，減小了對層流台操作空間的占用。

2. 濾膜預先滅菌,即拆即用,可將主要汙染物源降低,提高檢測可靠性

3.過濾杯采用唇形密封設計,不使用夾鉗和 O 型圈,確保無泄 漏操作和均勻的微生物回收率

4.可同時抽濾多張濾膜，大大提高了工作效率。

5.濾杯采用可重複使用材料設計，經久耐用，節省成本，操作方便。

6.每個(ge) 濾頭采用獨立控製的方式，方便操作人員靈活使用。

7.無油真空泵設計，噪音低。

8.儀(yi) 器表麵經鏡麵處理，便於(yu) 清潔和消毒。

9.過濾頭可以火焰快速滅菌,方便連續實驗操作；

10.已氧化的美觀的把手分布基座兩(liang) 端，使其更加穩固；

11.穩固的低重心設計使其不會(hui) 因溶液滿載而發生翻倒。

薄膜過濾法微生物限度檢查CYW-300S技術參數：

1、適用濾膜直徑：Φ47mm/50mm；

2、有效過濾直徑：40mm；

3、濾杯容量:150ML(250ml 可選）；

3、過濾頭數量：1/3/6 ；

4、檢測方法：薄膜過濾法；

5、抽濾方式：隔膜泵負壓抽濾，無需抽氣瓶；

6、抽液速率：100ml/15s；

7、過濾頭滅菌方式：濕熱滅菌

8、濾頭：可拆裝。

微生物限度檢查方法(薄膜過濾法)
驗證方案
微生物限度檢查方法(薄膜過濾法) 驗證方案
編碼：表
一、驗證方案的起草與(yu) 批準
1.驗證方案起草
起草人： 起草時期： 年 月 日
2.驗證小組成員：
3.驗證方案審核
4.驗證方案批準
批準人： 批準日期：
二、驗證方案
1.驗證目的和原理
1.1驗證目的
為(wei) 確認所采用的方法適合於(yu) 該藥品的細菌、黴菌、酵母菌數的測定，特製定本方案。驗證過程應嚴(yan) 格按照本方案規定的內(nei) 容進行，若因特殊原因確需要變更時，應報驗證委員會(hui) 批準。
1.2原理
通過比較試驗4組中試驗菌的恢複生長結果來評價(jia) 整個(ge) 檢驗方法的準確性、有效性和重現性。
2.驗證方法步驟
2.1驗證前的準備：進行微生物限度檢查方法（薄膜過濾法）驗證前，所有的平皿和稀釋劑都應該嚴(yan) 格
按照相關(guan) 的滅菌程序消毒，以確保其對試驗的結果沒有影響。試驗菌應包括G—、G+、酵母菌和黴菌類微生物以基本覆蓋樣品中可能存在的微生物。
2.2驗證試驗的操作計劃：用3個(ge) 不同批號產(chan) 品微生物限度檢測方法進行平行試驗，通過計算回收率來判斷限度檢查方法是否對產(chan) 品有影響。
2.3試驗結果可接受標準：用標準菌株評價(jia) 方法“ "的微生物限度檢查對檢品中微生物的抑製性，試驗結果應顯示3次獨立的平行試驗中，稀釋劑對照組的菌回收率應不小於(yu) 70%，試驗組回收率也不低於(yu) 70%。
3.試驗實施
3.1試驗前的準備
3.1.1主要儀(yi) 器設備：恒溫培養(yang) 箱、生化培養(yang) 箱、電子天平、高壓蒸汽滅菌器、淨化工作台。
3.1.2操作環境：操作間應該安裝空氣除菌過濾層裝置。環境潔淨度不應低於(yu) 10000級，局部潔淨度為(wei) 100級（或放置同等級淨化工作台）。操作間或淨化工作台的潔淨空氣應該保持對環境形成正壓，不低於(yu) 4.9pa。
3.1.3試驗樣品：
批號： 批號： 批號：
3.1.4培養(yang) 基：
3.1.5稀釋液：PH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩衝(chong) 液
以上經115℃高壓蒸汽滅菌30min。
3.1.6驗證用微生物名稱及其編號
實驗菌株的來源：
編號由菌名首字母—傳(chuan) 代代數—製備日期組成。
3.1.7器具：無菌薄膜過濾器：（孔徑0.45um直徑50mm）、無菌移液管（5ml）
4.驗證方法
4.1菌液的製備
將大腸埃希菌、枯草芽孢杆菌接種至10ml的無菌營養(yang) 肉湯中在30～35℃下培養(yang) 18～24小時，將白色念珠菌接種至改良馬丁液體(ti) 培養(yang) 基中，在23～28℃下培養(yang) 24～48小時。將黑曲黴接種至改良馬丁液體(ti) 培養(yang) 基中，在23～28℃下培養(yang) 5～7天。將上述培養(yang) 物用0.9%的無菌氯化鈉溶液製成每1ml含菌落數為(wei) 50～100cfu的菌懸液。
4.2實驗方法
供試液的製備：取樣品10g（ml）加入無菌PH7.0氯化鈉-蛋白腖緩衝(chong) 液100ml，振搖使分散均勻□，用勻漿儀(yi) 混勻□，置45℃水浴使膠囊殼溶化混勻□，製成1：10均勻的供試液。
A樣品試驗組
取1:10供試液（相當1g或1ml供試品）10ml，加至100ml稀釋液中混勻，過濾並用稀釋液衝(chong) 洗濾膜3次，每次100ml，在*後一次衝(chong) 洗液中加入50~100cfu菌液，濾完後，將接有細菌的濾膜取出，菌麵向上（接觸細菌和樣品的麵）貼於(yu) 已凝固的培養(yang) 基上。大腸埃希菌、枯草芽孢杆菌貼於(yu) 營養(yang) 瓊脂培養(yang) 基平皿上；白色念珠菌、黑曲黴貼於(yu) 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yang) 基平皿上。
B菌液組
取上述製備菌液各1ml加至100ml稀釋液中混勻，過濾並用稀釋液衝(chong) 洗濾膜3次，每次100ml，濾完後，將接有細菌的濾膜取出，菌麵向上（接觸細菌和樣品的麵）貼於(yu) 已凝固的培養(yang) 基上。大腸埃希菌、枯草芽孢杆菌貼於(yu) 營養(yang) 瓊脂培養(yang) 基平皿上；白色念珠菌、黑曲黴貼於(yu) 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yang) 基平皿上。
C供試品對照組
取上述1：10供試液10ml，加至100ml稀釋液中混勻，過濾並用稀釋液衝(chong) 洗濾膜3次，每次100ml，濾完後，將濾膜取出，接觸樣品的麵向上貼於(yu) 已凝固的培養(yang) 基上。大腸埃希菌、枯草芽孢杆菌貼於(yu) 營養(yang) 瓊脂培養(yang) 基平皿上；白色念珠菌、黑曲黴貼於(yu) 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yang) 基平皿上。
D稀釋劑對照組
取PH7.0氯化鈉-蛋白腖緩衝(chong) 液衝(chong) 洗濾膜3次，每次100ml，在*後一次衝(chong) 洗液中加入50~100cfu菌液，濾完後，將接有細菌的濾膜取出，菌麵向上貼於(yu) 已凝固的培養(yang) 基上。大腸埃希菌、枯草芽孢杆菌貼於(yu) 營養(yang) 瓊脂培養(yang) 基平皿上；白色念珠菌、黑曲黴貼於(yu) 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yang) 基平皿上。
4.3培養(yang)
將大腸埃希菌、枯草芽孢杆菌在30～35℃下培養(yang) 48小時，將白色念珠菌、黑曲黴在23～28℃下培養(yang) 72小時，點計菌落數。
5.試驗結果
5.1產(chan) 品試驗組微生物生長檢查情況： 批號：
5.2供試品對照組微生物生長檢查情況： 批號：
5.3稀釋劑對照組微生物生長檢查情況： 批號：
5.4菌液組微生物生長檢查情況： 批號：
6.回收率計算
6.1稀釋劑對照組菌回收率
表中：回收率=稀釋劑對照組的平均菌落數÷菌液組的平均菌落數×100%。
6.2試驗組菌回收率
表中：回收率=（試驗組的平均菌落數－供試品對照組的平均菌落數）÷菌液組的平均菌落數×100%。
7.結論：
7.1經過驗證，大腸埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲黴的回收率分別為(wei) %、 %、 %、 %、 %。
7.2稀釋劑回收率為(wei) %、 %、 %、 %、 %。
以上驗證結果證明，本品 采用上述方法進行微生物限度檢查。
檢驗人： 複核人：
8.驗證結果評價(jia) 分析
質控部負責各項驗證、試驗結果記錄，驗證小組根據驗證、試驗結果進行評價(jia) ，起草驗證報告，報驗證委員會(hui) 。
驗證委員會(hui) 負責對驗證結果進行綜合評審，做出驗證結論，發放驗證證書(shu) 。對驗證結果的評審應包括：
（1） 驗證試驗是否有遺漏；
（2） 驗證實施過程中對驗證方案有修改原因、依據以及是否經過批準；
（3） 驗證記錄是否完整；
（4） 驗證試驗結果是否符合標準要求，偏差及對偏差的說明是否合理，是否需進一步補充試驗。
9.*終審批
驗證報告由驗證組長審核後，報驗證總負責人批準，並簽發驗證證書(shu) 。
驗證報告
年 月 日至 年 月 日，驗證小組根據批準的微生物限度檢查方法（薄膜過濾法）驗證文件對微生物限度檢查法進行了相關(guan) 的一係列驗證工作，達到了預期效果，滋將有關(guan) 事項說明如下：
1、 驗證方案在實施過程中未做修改。
2、 驗證方案各項性能指標在驗證中未作變動，誤差在允許範圍內(nei) 。
3、 驗證過程中結果符合規定要求，記錄完整屬實。
4、 驗證結果符合設計要求和GMP原則要求，可以投入使用。
5、 組分或檢驗條件改變時須重新驗證。
以上情況，請驗證委員會(hui) 審批！
驗證小組：
年 月 日