生化培養箱在大腸菌群培養中應用
1.培養(yang) 溫度的要求總大腸菌群中的細菌除生活在腸道中外,在自然環境中的水與(yu) 土壤中也經常存在,但此等在自然環境中生活的大腸菌群培養(yang) 的合適溫度為(wei) 25℃左右,如在37℃培養(yang) 則仍可生長,但如將培養(yang) 溫度再升高至44.5℃,則不再生長,而直接來自糞便的大腸菌群細菌,習(xi) 慣於(yu) 37℃左右生長,如將培養(yang) 溫度升高至44.5℃仍可繼續生長。
因此,可用提高培養(yang) 溫度的方法將自然環境中的大腸菌群與(yu) 糞便中的大腸菌群區分,兩(liang) 種方法也都基於(yu) 此理。
將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yang) 基放入生化培養(yang) 箱時,箱內(nei) 溫度一定要達到所要求的溫度(44.5±0.5℃)時,方可放入。
如用恒溫水浴箱時,其水麵要高於(yu) 接種物麵,放濾膜的培養(yang) 皿要沉到水浴箱底部。
2.加氯水樣的處理經氯處理消毒過的水樣,水中含有一定量的餘(yu) 氯,使大腸菌群處於(yu) 受損或受抑製狀態,在采集水樣時應提前在采樣瓶中加硫代硫酸鈉,硫代硫酸鈉可以脫氯,使受損的細菌得以複蘇與(yu) 修複,從(cong) 而避免出現計數結果偏低甚至假陰性的現象。此外餘(yu) 氯對濾膜法培養(yang) 的細菌其抑製作用尤為(wei) 明顯,所以抽濾時應對水樣進行大量無菌水稀釋,以減少餘(yu) 氯的殘留。
3.樣品的保存采樣用的容器使用前應蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置幹燥箱160℃-170℃幹熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。
采樣後水樣的正確保存也很重要,如保存不當可使樣品中的大腸菌群細菌死亡或在一定條件下再生長,這些都將影響檢測結果的準確性。
檢測室接到水樣後,應立即檢測,如因故不能檢測時,應立即將樣品置於(yu) 冰箱內(nei) (2℃-10℃)並於(yu) 2小時內(nei) 檢測。