凱氏定氮儀基本原理及其校準應用
1 凱式定氮儀(yi) 工作原理結構
凱式定氮儀(yi) 作為(wei) 一種依照凱式定氮法基礎上所設計的儀(yi) 器,主要運用於(yu) 對混合物、化合物內(nei) 總氮含量的測量。能夠實現對於(yu) 現有所處的催化劑條件下,通過運用液標準完成測定,通過計算酸的消耗量能夠完成樣品內(nei) 的含氮量計算。由於(yu) 蛋白質的含氮量係數計算較為(wei) 恒定,能夠依照氮含量與(yu) 換算係數相乘,可得蛋白質總含量,作為(wei) 該方法定量測定蛋白質比較經典。
1.1 消化
(見圖1)作為(wei) 比較傳(chuan) 統的凱式定氮法消化、蒸餾裝置。通過在燒瓶內(nei) 混合加入樣品證能夠浸潤樣品。並置於(yu) 燒瓶在經過預熱至420℃消化單元內(nei) ,直至經過消化處理燒瓶內(nei) 消化液呈現透明澄清藍綠色,長達0.5~1h的繼續加熱轉變樣品內(nei) 存在的有機氮,直至生成無機氮-銨[3]。
1.2 蒸餾
對於(yu) 消化液取下放冷,在加入至50mL水內(nei) ,將50mL稱取後加入至接收瓶內(nei) ,然後將混合指示劑加入其中。將蒸餾裝置連接好之後將5mL過溶液加入至消解燒瓶內(nei) ,可以中和成為(wei) 所需運用,之後蒸餾過程開始。轉化消化液內(nei) 存在的銨銀形成氮餾出,之後可以被過量所吸收[4]。
1.3 滴定及計算
通過運用酸標準溶液,滴定洗手液直至終點,對其中存在的氮、蛋白質含量計算公式如下[5]:
式中:氮含量用N表示;滴定試樣所需的標準酸溶液體(ti) 積用V1表示;滴定空白所需的標準酸溶液用V0表示;對標定時溶液濃度用c表示;試樣的質量用m表示;試樣消化液的總體(ti) 積用V表示;試樣內(nei) 的消化液蒸餾所需體(ti) 積用v表示。
通過計算之後進行不同試樣種類,氮含量與(yu) 對應氮換算所得蛋白質係數相乘,即可得出蛋白質含量。