厭氧培養箱的操作注意事項

1.        儀(yi) 器盡可能地安裝於(yu) 空氣清淨、溫度變化較小的地方；

2.        開機前應全麵熟悉和了解各組成配套儀(yi) 器、儀(yi) 表的使用說明，掌握正確使用方法；

3.        培養(yang) 物放入必須是在操作室內(nei) 達到厭氧環境後放入；

4.        如發生故障（停氣等原因）操作室內(nei) 仍可保持10小時厭氧狀態（超過10小時則根據需要把培養(yang) 物取出另作處理）；

5.        經常注意氣路有無漏氣現象；

6.        調換氣瓶時，注意要紮緊氣管，避免流入含氧氣體(ti) ；

真空泵按要求使用，定期檢查加油。

一、操作室厭氧環境形成

1 按使用要求放置好必要的配件和器具，並向操作室內(nei) 放入二個(ge) 無毒塑料袋。

2 通電源開照明燈，開控溫儀(yi) ，調節所需溫度及安全溫度。

3 操作室內(nei) 放入1000g鈀粒(封閉)和500g幹燥劑,並放入美蘭(lan) 指示劑(封閉)。

4 關(guan) 緊取樣室內(nei) 外門，並抽真空校驗。

5 操作室內(nei) DI一次置換（氮氣置換）：

（1）先用橡皮管插入操作室內(nei) 進氣口，另一頭插入塑料袋。

（2）接通氮氣進氣路，打開氮氣控製閥，使二隻塑料袋充足氮氣，然後紮緊袋口。

（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭(lan) 圈上並紮緊。

（4）把塑料袋內(nei) 氮氣漸漸地放於(yu) 操作室內(nei) ，至全部放出。

6 操作室DI二次置換（氮氣置換）重複一 次充氮過程，並注意隨時用腳踏開關(guan) 開閉排氣。

7 操作室DI三次置換（混合氣體(ti) 置換）：

（混合氣體(ti) 配比為(wei) ：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）

（1）調換氣路打開混合氣道通閥門進氣，充氣時要隨時腳踏開關(guan) 開閉排氣。

（2）混合氣充滿塑料袋後，關(guan) 掉混合氣直通閥（三通閥），使混合氣經過流量計輸入操作並調整流量計，流量為(wei) 每分鍾10毫升左右。

（3）把塑料袋內(nei) 混合氣漸漸排於(yu) 操作室內(nei) 。

（4）通過三次換氣後，操作室內(nei) 氣體(ti) 含氧量已處於(yu) 極微量狀態。

8 操作室內(nei) 打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一 小時後打開美蘭(lan) 指示劑（美蘭(lan) 安瓶）觀察其變況，不變色為(wei) 操作室內(nei) 達到厭氧環境。

9 開紫外線滅菌燈，室內(nei) 進行滅菌處理。滅菌時間自定。

二、菌種的置入和培養(yang)

1 檢查取樣室內(nei) 門並關(guan) 緊之。

2 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室後即關(guan) 上外門。

3 取樣室充氮置換三次過程：先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停,然後人工打開氮氣閥門進氣,使指針回複零位後進行下次操作。

4 如選定真空度較低就需要增加置換的次數。

5 取樣室內(nei) 外門開啟，關(guan) 緊要抽低真空度100毫米汞柱（13 Kpa）檢驗及幫助操作。

6 厭氧培養(yang) 箱需要長期連續使用的條件：

（1）每天在操作室內(nei) 打開美蘭(lan) 指示劑觀察，正常情況下使用。如不正常就必須重新換氣。

（2）要長期連續輸入微量的混合氣體(ti) ，使補進的氫氣能和微量的氧結合通過催化吸收，保證了室內(nei) 厭氧狀態，補入混合氣流量選定為(wei) 每分鍾10毫升左右。

（3）連續培養(yang) 運行一 天，更換一 次除氧劑和幹燥劑。

7 接種棒滅菌器的應用：

（1）隨時用鎳鉻電熱絲(si) 使電極短路而變赤熱以進行殺菌（接種棒）

（2）熔蠟處可直接放上，試管封蠟口旋轉熔蠟。

8 操作室裏的培養(yang) 箱內(nei) 的溫度可任意選擇和控製。

9 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整：調節減壓閥，使輸出壓力為(wei) 0.1Mpa左右。